Núcleo de Servicios del Instituto de Latencia del Cáncer
Nuestro equipo trabaja en estrecha colaboración con investigadores, aprendices y personal técnico del Montefiore Einstein Comprehensive Cancer Center y del Albert Einstein College of Medicine para avanzar en la investigación sobre la biología de las células cancerosas residuales que permanecen latentes antes y después de la terapia inicial, o como consecuencia de la terapia (células cancerosas persistentes).
Ofrecemos servicios especializados que abordan las necesidades comunes de los laboratorios que ingresan a la exploración de la latencia del cáncer, incluidas preguntas relacionadas con:
- ¿Qué modelo utilizar?
- ¿Qué marcadores incorporar para perfilar las células cancerosas?
- ¿Cómo aislar estas células cancerosas?
Un obstáculo importante en el estudio de la latencia del cáncer es la elección del modelo adecuado para los distintos tipos de cáncer. Las células latentes son poco frecuentes y difíciles de identificar y caracterizar mediante métodos estándar. Es fundamental contar con protocolos, modelos y marcadores especializados para detectar y caracterizar estas células en el contexto de diferentes modelos de cáncer.
El Centro de Servicios del Instituto de Dormancia del Cáncer ofrece a los investigadores asesoramiento experto sobre marcadores, modelos murinos, desarrollo de protocolos y métodos de aislamiento de células raras. También podemos asistir en el desarrollo de estudios in vitro en modelos murinos y aviares relacionados con la metástasis, la latencia de células cancerosas diseminadas locorregionales y a distancia, y la reactivación en diversos modelos de cáncer.
Nuestro centro mantiene un catálogo de marcadores, anticuerpos validados y protocolos estandarizados para estudios de latencia y recurrencia del cáncer. Ofrecemos asesoramiento e información sobre marcadores y métodos para detectar células cancerosas latentes en muestras humanas.
El Centro de Servicios del Instituto de Dormancia del Cáncer también ofrece orientación técnica para comprender cómo los entornos específicos de cada nicho pueden influir en la programación y reactivación de la latencia. También podemos ayudar a diseñar enfoques experimentales para responder a preguntas específicas.
Este núcleo de servicios está diseñado para eliminar las barreras a la investigación sobre la latencia del cáncer.
Director del Instituto de Latencia del Cáncer
Equipo central de servicios del Instituto de Latencia del Cáncer
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Para apoyar los proyectos aprobados, los Dres. Kadamb y Singh, asesores del núcleo de servicio del Instituto de Inactividad Oncológica, colaboran estrechamente con la dirección, ofreciendo orientación y asesoramiento a los investigadores principales del Cancer Center en formación y al personal técnico encargado del trabajo. También pueden coordinar la presentación inicial de los proyectos propuestos al equipo.
Asesores principales del servicio del Instituto de Latencia del Cáncer
Rama Kadamb, PhD
Científico del personal
Correo electrónico: rama.kadamb@einsteinmed.edu
Teléfono: 718-678-1547
Deepak Singh, PhD
Instructor
Correo electrónico: deepak.singh@einsteinmed.edu
Teléfono: 718-678-1109
Servicios técnicos y de asesoramiento
Marcadores, anticuerpos, construcciones y métodos de detección
Mantenemos una lista actualizada de marcadores y mediadores de latencia y reactivación que pueden utilizarse in vitro, in vivo y en estudios con muestras humanas. Además, hemos validado anticuerpos y protocolos para su detección en muestras in vitro, in vivo y humanas. Los marcadores de senescencia pueden emplearse para distinguir células cancerosas latentes. Otros métodos disponibles incluyen el uso de DEPArray™ y otras herramientas de aislamiento celular poco comunes para aislar y perfilar células tumorales circulantes (CTC) o células cancerosas diseminadas en pulmones, cerebro, ganglios linfáticos y médula ósea de ratones, así como para aislar CTC humanas.
Firmas genéticas
Podemos proporcionar acceso a firmas genéticas que informan sobre programas de latencia en células madre, células cancerosas y células madre embrionarias, así como firmas derivadas de fibroblastos senescentes y otros modelos de cáncer donde la latencia fue inducida por manipulación farmacológica o genética.
Pequeñas moléculas para inducir la latencia o atacar células cancerosas latentes
Proporcionamos información sobre pequeñas moléculas, morfógenos y biomoléculas disponibles comercialmente capaces de inducir estados de latencia en las células cancerosas y podemos asesorar sobre cómo implementar dichos tratamientos farmacológicos.
Líneas celulares
Mantenemos un repositorio de líneas celulares humanas y murinas de uso común en estudios de metástasis y latencia del cáncer.
Modelos in vitro
Proporcionamos ayuda técnica para establecer cultivos 3D, organoides, esferoides y modelos de rastreo celular que complementen los modelos in vivo al estudiar los mecanismos de latencia.
Modelos de ratón singénicos y de xenoinjerto
Ofrecemos orientación técnica y de diseño experimental sobre cómo utilizar modelos de ratón modificados genéticamente (GEMM) para estudios de latencia y recurrencia, así como modelos singénicos utilizando líneas celulares de ratón o cultivos primarios in vivo. Además, ofrecemos orientación técnica y de diseño experimental para generar modelos de xenoinjertos a partir de líneas celulares humanas o xenoinjertos derivados de pacientes proporcionados por el investigador o suministrados a través de nuestro repositorio. Los métodos de implantación de células y tejidos incluyen subcutáneo, intraperitoneal, intravenoso, intracardíaco, intraesplénico, intracraneal y ortotópico. Los modelos de ratón también incluyen GEMM donde reporteros o perturbaciones específicas afectan a las células huésped que se sabe que afectan la latencia de las células cancerosas. Esto último permite explorar los mecanismos microambientales y específicos del nicho que dictan la latencia de las células cancerosas. Estos modelos también incluyen el análisis de nichos celulares inmunes y no inmunes.
Reporteros fluorescentes y/o basados en luciferasa y en el ciclo celular
Para identificar células tumorales diseminadas latentes in vitro e in vivo, empleamos un conjunto de herramientas de reporteros fluorescentes y/o basados en luciferasa, así como herramientas de codificación de proteínas. Estas herramientas permiten monitorizar la latencia, la reactivación y las poblaciones clonales del cáncer in vitro e in vivo. Nuestro laboratorio ha utilizado con éxito los siguientes reporteros y sensores basados en el ciclo celular para identificar células latentes in vivo.
DTC inactivos
Lesión proliferativa
Detección de DCC latentes y proliferativos de melanoma uveal en hígado de ratón mediante el sistema de reportero de retención de marca H2B-GFP/td-Tomato. Los DCC de melanoma uveal latentes expresan tanto H2B-GFP como td-Tomato, mientras que los DCC de lesión de melanoma uveal proliferativo pierden la expresión de H2B-GFP y expresan únicamente td-Tomato.
Células T-HEp3 con biosensor p27K-mVenus (la señal de mVenus indica detención del ciclo celular).
Recursos de imágenes
En alianza con el Centro de Biofotónica Gruss Lipper del Colegio de Medicina Albert Einstein, el Centro de Servicio puede emplear microscopía de alta resolución de tejidos fijados o congelados, así como protocolos de imágenes intravitales, para brindar orientación sobre los mejores protocolos de práctica para detectar y cuantificar fenotipos de células cancerosas latentes y los nichos que albergan estas células.
Interacción entre los macrófagos alveolares y los DCC de lesión temprana HER2+ en el pulmón
DCC en la médula ósea de pacientes con cáncer de mama
Detección de CTC en la sangre de pacientes con cáncer de próstata
Detección de DCC en el hígado de pacientes con melanoma uveal.
DCC en los pulmones de modelos de ratón MMTV-HER2
Expresión del marcador de latencia (ZFP281) en pacientes con cáncer de mama
Modelo de xenoinjerto de membrana corioalantoidea (CAM) aviar
Ofrecemos orientación y ayuda para establecer un diseño experimental para el modelo CAM. El ensayo CAM (ensayo de membrana corioalantoidea) es un modelo in vivo ampliamente utilizado para el estudio de la angiogénesis, el crecimiento tumoral, la metástasis y el análisis de fármacos. Utiliza la membrana corioalantoidea de un embrión de pollo en desarrollo como andamiaje biológico. Características principales del modelo CAM:
- Permite el injerto de células cancerosas humanas y de ratón sin rechazo debido al sistema inmunológico subdesarrollado del embrión de pollo.
- Útil para estudiar la extravasación de células cancerosas, un paso clave en la metástasis, a diferentes órganos como el hígado, los pulmones y el cerebro de los embriones en desarrollo.
- Modelo perfecto para monitorear el crecimiento longitudinal de tumores mediante métodos de imágenes no invasivos utilizando células diseñadas para expresar proteínas fluorescentes como H2B-GFP, p27-venus y luciferasa de luciérnaga.
Publicaciones relevantes
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Los macrófagos alveolares residentes en los pulmones regulan el momento de la metástasis del cáncer de mama
Dalla E, Papanicolaou M, Park MD, Barth N, Hou R, Segura-Villalobos D, Valencia Salazar L, Sun D, Forrest ARR, Casanova-Acebes M, Entenberg D, Merad M, Aguirre-Ghiso JA. Celúla. 14 de noviembre de 2024;187(23):6631-6648.e20. doi: 10.1016/j.cell.2024.09.016. Publicación electrónica del 7 de octubre de 2024. PMID: 39378878.
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MacroH2A impide el crecimiento metastásico al imponer un programa de latencia discreto en células cancerosas diseminadas
Sun D, Singh DK, Carcamo S, Filipescu D, Khalil B, Huang X, Miles BA, Westra W, Sproll KC, Hasson D, Bernstein E, Aguirre-Ghiso JA. Ciencia avanzada. 2 de diciembre de 2022;8(48):eabo0876. doi: 10.1126/sciadv.abo0876. Publicación electrónica del 2 de diciembre de 2022. PMID: 36459552; PMCID: PMC10936054.
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ZFP281 impulsa un programa de latencia similar al mesenquimal en células de cáncer de mama de diseminación temprana que previene el crecimiento metastásico en el pulmón.
Nobre AR, Dalla E, Yang J, Huang X, Wullkopf L, Risson E, Razghandi P, Anton ML, Zheng W, Seoane JA, Curtis C, Kenigsberg E, Wang J, Aguirre-Ghiso JA. Nat Cáncer. 2022 octubre;3(10):1165-1180. doi: 10.1038/s43018-022-00424-8. Publicación electrónica del 1 de septiembre de 2022. PMID: 36050483.
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Las células madre mesenquimales NG2+/Nestin+ de la médula ósea impulsan la latencia del DTC a través de TGFβ2
Nobre AR, Risson E, Singh DK, Di Martino JS, Cheung JF, Wang J, Johnson J, Russnes HG, Bravo-Cordero JJ, Birbrair A, Naume B, Azhar M, Frenette PS, Aguirre-Ghiso JA. Nat Cáncer. Marzo de 2021;2(3):327-339. doi: 10.1038/s43018-021-00179-8. Publicación electrónica del 11 de marzo de 2021. PMID: 34993493; PMCID: PMC8730384.
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Mecanismo de diseminación temprana y metástasis en el cáncer de mama Her2+
Harper KL, Sosa MS, Entenberg D, Hosseini H, Cheung JF, Nobre R, Avivar-Valderas A, Nagi C, Girnius N, Davis RJ, Farias EF, Condeelis J, Klein CA, Aguirre-Ghiso JA. Naturaleza. 22 de diciembre de 2016; 540 (7634): 588-592. doi: 10.1038/naturaleza20609. Publicación electrónica del 14 de diciembre de 2016. Errata en: Naturaleza. 18 de enero de 2018; 553 (7688): 366. doi: 10.1038/naturaleza24666. PMID: 27974798; PMCID: PMC5471138.
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Latencia en el cáncer de mama
Erica Dalla # 1, Amulya Sreekumar # 2, Julio A Aguirre-Ghiso 3, Lewis A Chodosh 4 5
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Mecanismos de latencia diseminada de células cancerosas: un campo en desarrollo
María Soledad Sosa 1, Paloma Bragado 2, Julio A Aguirre-Ghiso 3
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Modelos, mecanismos y evidencia clínica de la latencia del cáncer
Julio A. Aguirre-Ghiso 1
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Asesores principales del servicio del Instituto de Latencia del Cáncer
Rama Kadamb, PhD
Científico del personal
Correo electrónico: rama.kadamb@einsteinmed.edu
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Deepak Singh, PhD
Instructor
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